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α2-纤溶酶抑制抗原

1 拼音

α2-xiān róng méi yì zhì kàng yuán

2 英文参考

α2-plasmin inhibitory antigen

3 概述

α2纤溶酶抑制物主要由肝脏合成,一种单链糖蛋白,是体内特异的抑制活性的丝氨酸蛋白酶,有限时性抑制纤溶酶的作用和抑制纤溶酶原纤维蛋白结合,防止纤维蛋白被抗纤溶酶水解的作用。

4 α2-纤溶酶抑制抗原的医学检查

4.1 检查名称

α2-纤溶酶抑制抗原

4.2 分类

临床血液检查 > 出血和凝血检查

4.3 α2-纤溶酶抑制抗原的测定原理

本试验根据双抗体夹心法原理,即将纯化的t-PA单克隆抗体包被在固相载体上温育,然后加含有抗原的待测标本。标本中的t-PA抗原与固相载体上的抗体形成复合物。此复合物与过氧化物酶标记的t-PA单克隆抗体起抗原抗体结合反应,形成t-PA-POD复合物。后者可使邻苯二胺基质液呈棕色反应,其反应颜色深浅与标本中t-PA含量呈正比关系。

4.4 试剂

(1)抗体:抗t-PAF(2b')2

(2)过氧化物酶抗体复合物抗:t-PA-peroxidase。

(3)基质:邻苯二胺。

(4)基质缓冲液:0.2mol/L柠檬酸,0.2mol/L柠檬酸钠缓冲液。

(5)稀释缓冲液:白蛋白-磷酸盐缓冲液(PBS-BSA)。

(6)洗涤液:0.025mol/L氯化钙-Tween-20-PBS缓冲液。

(7)t-PA标准:组织纤溶酶原缴活物。

(8)0.11mol/L柠檬酸钠溶液

(9)30% H2O2

(10)终止液:3mol/L硫酸或1mol/L盐酸

4.5 操作方法

(1)用0.05mol/L碳酸盐缓冲液稀释t-PA抗体。

(2)用稀释缓冲液稀释抗体-POD结合物。

(3)用基质缓冲液溶解邻苯二胺(8mg/ml),并加入10μl 30% H2O2

(4)将t-PA标准倍比稀释成10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125IU/ml。

(5)标本稀释:1份柠檬酸钠抗凝血浆加5份稀释液。如果估计t-PA值增高,血浆作1∶10稀释。

(6)用稀释之t-PA抗体包被ELISA反应板,每孔200μl,温育过夜,然后用洗涤液洗3次。

(7)加标准/标本200μl,温育1h后,同上洗涤3次。

(8)加过氧化物酶抗体复合物200μl,温育1h后,同上洗涤3次,洗后立即加基质。

(9)每孔加基质200μl,显色10~15min。

(10)加硫酸(3mol/L)50μl或盐酸(1mol/L)100μl,10min中止反应,于492nm,2h内比色,以稀释缓冲液为本底。

(11)据吸光度读数由标准曲线查得t-PA含量。

4.6 正常值

1~12ng/ml。

4.7 化验结果临床意义

(1)t-PA含量随年龄、剧烈运动和应激反应而增高,静脉滞留导致t-PA含量增加。

(2)先天性t-PA含量增高症。

(3)高血脂、肥胖症、口服避孕药冠心病心肌梗死动脉血栓形成、缺血性中风等t-PA含量减低。

4.8 附注

ELISA法是一项特异性敏感性较高的免疫学试验。因此必须严格控制每项试验的条件。

4.9 相关疾病

肥胖症、血栓形成

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