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氰化高铁血红蛋白测定法

1 拼音

qíng huà gāo tiě xuè hóng dàn bái cè dìng fǎ

2 英文参考

cyanmethemoglobin determination method

3 概述

Hb测定大致分为:①根据Hb分子组成,测定总Hb法(全血铁法);②根据血液物理特性测Hb(比重法、折射仪法);③根据Hb与O2可逆性结合的特性测Hb(血气分折法);④根据Hb衍生物光谱特点进行的定量测定等4大类,其中有些方法简单易行,而得到长期广泛应用(如沙利法),但随着技术的进步和研究的深入,缺点日渐显著,逐渐被淘汰。为统一Hb测定方法,1966年国际血液学标准化委员会推荐氰化高铁Hb测定法作为Hb测定标准法。1978年国际临床化学联合会和世界病理学会联合发表的国际性文件中重申了HiCN法。

4 氰化高铁血红蛋白测定法的别名

氰化高铁Hb测定法

5 分类

临床血液检查 > 红细胞

6 取材

血液

7 氰化高铁血红蛋白测定法的原理

血液在Hb转化液中溶血后,除SHb外各种Hb均可被高铁氰化钾氧化为高铁Hb再与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁Hb。HiCN最大波峰在540nm,最小吸收峰为504nm。特定标准条件下,毫摩尔消光系数为44L·mmol-1·cm。因此,根据标本的吸光度,即可测定Hb浓度。

在没有符合WHO标准的分光光度计的条件下,亦可用HiCN参考液制标准曲线,或计算出换算常数,间接计算Hb浓度(g/L)。

HiCN的消光系数是44mmol-1·cm-1,可根据下列公式进行计算Hb浓度:

A/44×64458(mg)/1000×251=A×367.7=Hb(g/L)

式中A是在540nm处HiCN吸光度,64458mg是Hb的毫克分子量,1000是将毫克转换为克,251是实验时血液的稀释倍数。但使用367.7这一常数是有条件的,是基于在仪器、比色杯、试剂及操作均严格的要求下。才能直接使用。

8 试剂

KCN。

9 操作方法

HiCN法。

10 正常值

成年男性(120~170)g/L;成年女性(110~150)g/L;新生儿(170~220)g/L。

11 化验结果临床意义

(1)增多:

①生理性变化:新生儿、高山地区居民、剧烈体力劳动或体育运动、超力型人等。

②病理性变化:

A.红细胞增多症继发性或相对性):大量脱水所致血液浓缩(剧烈呕吐、频繁腹泻多汗多尿、严重灼伤、长期禁食者)、机体长期缺氧(紫绀先天性心脏病肺源性心脏病、慢性高山病、严重肺气肿)、慢性一氧化化碳中化碳中毒等。

B.真性红细胞增多症

(2)减少:

①生理性变化:妊娠中、后期的稀血症。

②病理性变化:

A.失血贫血内脏出血血友病血小板减少性紫癜等。

B.溶血性贫血先天性溶血性贫血(地中海贫血蚕豆病、先天性非球形红细胞贫血、先天性溶血性黄疸等),后天获得性贫血(自身免疫性溶血性贫血新生儿溶血病阵发性睡眠性血红蛋白尿、红细胞碎片综合征药物性溶血性贫血:奎宁奎尼丁非那西丁等,毒物性溶血性贫血:苯、铅、砷等,感染性溶血性贫血)等。

C.造血不良性贫血:缺铁性贫血恶性贫血营养不良性贫血、再生障碍性贫血等。

12 附注

HiCN法具有操作简单、显色快且稳定(显色后如何存得当可6年不退色),除SHb外各种Hb均可检测、读取吸光度后可直接定值等优点。决定测定结果准确的关键在于仪器的校正。在实际工作中,使用的分光光度计很难达到标准要求,往往通过K值来校正结果,定期地检查K值十分重要。

HiCN法被列为Hb测定的国际参考方法。但在实际应用中尚存在一些问题,其致命点是KCN是剧毒,管理使用不当可造成公害,此外高白细胞和高球蛋白血症可致试剂混浊,以及HbCO转化较慢的问题也未完全解决。

13 相关疾病

脱水、腹泻、肺气肿、一氧化碳中毒、真性红细胞增多症、血小板减少性紫癜、溶血性贫血、黄疸、新生儿溶血病、阵发性睡眠性血红蛋白尿、缺铁性贫血、再生障碍性贫血

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