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循环免疫复合物

1 拼音

xún huán miǎn yì fù hé wù

2 英文参考

circulating immunocomplex,CIC

3 概述

免疫复合物(immune complex,IC)或抗原抗体复合物是抗原与其对应抗体相结合的产物。在正常情况下,机体内的游离抗原与相应抗体结合形成IC,可被机体的防御系统清除,作为清除异物抗原的一种方式对机体有利,但在某些情况下,体内形成的IC不能被及时清除,则可在局部沉积,通过激活补体,并在血小板中性粒细胞等参与下,引起一系列连锁反应而导致组织损伤,出现临床症状,称为免疫复合物病(immunocomplex disease,ICD)。

循环免疫复合物(circulating immunocomplex,CIC)是一类在抗原量稍过剩时,形成中等大小的可溶性IC(8.8~19S),它既不能被吞噬细胞清除,又不能通过肾小球滤孔排出、可较长时间游离于血液和其他体液中,当血管壁通透性增加时,此类IC可随血流沉积在某些部位的毛细血管壁或嵌合在肾小球基底膜上,激活补体导致ICD的发生检查组织内或循环IC的存在有助于某些疾病的诊断、发病机制的研究、预后估计、病情活动观察和疗效判断等。

CIC的检测方法大致可分为两类,即抗原特异性与抗原非特异性方法。前者通过区别游离的抗原和与抗体结合的抗原,选择性测定含有某种特定抗原的IC。在已知由某种抗原引起的免疫病理反应的疾病中,可应用此类方法。抗原非特异方法,则不考虑形成IC抗原的性质,根据免疫球蛋白分子在结合抗原以后发生的物理学和生物学特性的改变进行检测。但目前常用的试验均受到复合物内Ig种类及亚类、复合物大小、抗原与抗体比例、固定补体能力等因素的影响,在临床实验室应用常受到很大限制,因此很多实验室多采用几种不同实验方法来进行检测。

4 循环免疫复合物的医学检查

4.1 检查名称

循环免疫复合物

4.2 分类

免疫学检查 > 细胞免疫测定

4.3 循环免疫复合物的测定原理

(1)抗补体试验:血清中如有CIC存在时,可与内源性C1结合。将被检血清于56℃加热30min,能破坏结合的C1,空出补体结合位置。当加入豚鼠血清(外源性C1)与指示系统(致敏羊红细胞)时,CIC又可与外源性C1结合,使致敏羊红细胞的溶血反应受到抑制。其结果是以50%溶血管作为判定终点,凡测定管比对照管溶血活性低1管以上者,即为抗补体试验阳性,提示有CIC分子的存在。

(2)聚乙二醇PEG)沉淀试验:CIC分子量较大,相互结合的抗原抗体的构象发生改变,易被低浓度PEG自液相析出。PEG还可抑制CIC的解离,促进CIC进一步聚合成更大的凝聚物而被沉淀,最后利用透射比浊或散射比浊法可测出CIC的存在与含量。

(3)SPA夹心ELISA试验:金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)可与免疫复合物中IgG的Fc段结合。将待测血清由低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上,再以酶标记的SPA与之反应,即可检测检样中有无CIC。

(4)胶固素结合试验:胶固素(conglutin)是牛血清中的一种正常蛋白成分,能与CIC上的补体C3活化片段C3bi结合。将其包被于固相载体上,待测血清中CIC与之结合,再加酶标记的抗人IgG,以底物溶液显色,即可测知CIC的含量。

4.4 试剂

同抗补体、胶固素结合、PEG沉淀试验法。

4.5 操作方法

同抗补体、胶固素结合、PEG沉淀试验法。

4.6 正常值

血清:CIC为阴性(抗补体试验、胶固素结合试验)。血清:4.3±2.0,以≥8.3为免疫复合物阳性(PEG沉淀试验)。血清:<28.4mg/L(SPA夹心ELISA试验)。

4.7 化验结果临床意义

免疫复合物的检测对于判定疾病的活动性、治疗效果、预后以及探讨发病原因有重要意义。某些自身免疫性疾病(如全身性红斑狼疮类风湿性关节炎结节性多动脉炎等)、膜增殖性肾炎、急性链球菌感染后肾炎、传染病(如慢性乙型肝炎麻风登革热疟疾等)以及肿瘤患者,血清中都可能检出循环免疫复合物。

4.8 附注

(1)抗补体试验:混合豚鼠血清一般1∶100稀释后应用。-30℃保存2周后或夏季取血,豚鼠补体活性会有所下降,用前可先滴定。选取0.1ml可引起50%溶血的补体稀释度;豚鼠血清切忌反复冻融,已融化未用完者应弃去;被检血清样本应新鲜,无细菌污染与溶血。如当日不检测,应置于-30℃冻存;本法只能检出与补体结合的CIC,抗补体的任何因素均能干扰本试验结果。

(2)PEG沉淀试验:低密度脂蛋白可引起浊度增加,故应空腹取血;高丙种球蛋白血症或血脂含量过高,以及血清标本反复冻融,均易造成假阳性;此法快速、简便,但特异性较差,仅适于血清标本的筛查。

(3)SPA夹心ELISA试验:热聚合人IgG应分装贮存于-20℃,不宜反复冻融,否则易解聚。加入SPA至最终浓度5.0g/L,可使热聚合人IgG稳定;PEG浓度影响CIC沉淀的量,须严格控制

(4)胶固素结合试验:不能及时检测的标本应放-30℃保存,避免反复冻融;每次实验应设阴性和阳性对照,并按下列公式校正待检血清(包括调查正常人血清吸光度均值的血清和临床标本)的吸光度,校正的待检血清吸光度=待检血清吸光度/阳性参考血清吸光度,本法只能检出结合补体的大分子IgG类免疫复合物。

4.9 相关疾病

红斑狼疮、类风湿性关节炎、结节性多动脉炎、麻风、登革热、疟疾

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